Βιολογικές ιδιότητες των χλαμυδίων. Ταξινόμηση των παθογόνων για τον άνθρωπο χλαμυδίων Προκαρυωτικά χλαμύδια
Τα παθογόνα χλαμύδια, ιδιαίτερα το C. trachomatis, προκαλούν αρκετά συχνά οξεία ή χρόνια φλεγμονή της ουρήθρας, του κόλπου και του τραχήλου της μήτρας. Την τελευταία δεκαετία, τα ουρογεννητικά χλαμύδια ήταν πιο συχνά από τη σύφιλη και τη γονόρροια. Η κύρια οδός μετάδοσης της νόσου είναι η σεξουαλική, λιγότερο συχνά - οικιακή. Το υλικό για εργαστηριακή έρευνα είναι ξύσεις από τον βλεννογόνο της ουρήθρας σε άνδρες και γυναίκες και απόξεση από τον τράχηλο στις γυναίκες. Η Ουκρανική ND1 Δερματολογίας και Αφροδισιολογίας έχει αναπτύξει ενοποιημένες μεθόδους για τη διάγνωση των ουρογεννητικών χλαμυδίων. Μεταξύ αυτών, σημαντικές είναι οι γρήγορες μέθοδοι, η ταυτοποίηση μορφολογικών δομών και αντιγόνων των χλαμυδίων στο υπό μελέτη υλικό, η απομόνωση χλαμυδίων σε κυτταροκαλλιέργειες, η ανίχνευση χλαμυδιακών αντισωμάτων με ορολογικές αντιδράσεις και η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης.Μέθοδοι εξπρές
Ορισμένες CELA και γαλλικές εταιρείες έχουν αναπτύξει ειδικές διαγνωστικές εξετάσεις για ανοσοχρωματογραφικές μεθόδους εξπρές, οι οποίες μπορούν να παράγουν αποτελέσματα σε 10-30 λεπτά. Ωστόσο, η ευαισθησία και η ειδικότητά τους είναι σημαντικά μικρότερες από αυτές των μελετών πλήρους κλίμακας.Μικροσκοπικές μέθοδοι
Το υλικό δοκιμής λαμβάνεται από ασθενείς που δεν πρέπει να λαμβάνουν αντιβιοτικά για ένα μήνα. Οι ξύσεις γίνονται με αισθητήρα μιας χρήσης (βούρτσα, κουτάλι Volkmann, αυλακωτός καθετήρας). Το μολυσματικό υλικό εφαρμόζεται στην επιφάνεια ενός λάκκου 8 mm μιας ειδικής γυάλινης πλάκας. Το επίχρισμα ξηραίνεται για 20-30 λεπτά και στερεώνεται σε κρύο ακετόνη για 5-10 λεπτά, χρωματίζεται με τη μέθοδο Romanovsky-Giemsa για 35-40 λεπτά, υποβάλλεται σε επεξεργασία με οξινισμένη αιθανόλη (3-5 σταγόνες παγόμορφου οξικού οξέος ανά 15-20 ml αλκοόλης) για 5-10 δευτερόλεπτα, πλύθηκε με νερό, ξηράνθηκε και εξετάστηκε μικροσκοπικά. Τα δικτυωτά σωματίδια είναι βαμμένα μπλε-ιώδες και τα στοιχειώδη σωμάτια είναι ροζ-κόκκινα. Οι κοκκώδεις δομές των χλαμυδίων βρίσκονται κοντά στον πυρήνα. Η αναγνώριση 5-10 τυπικών εγκλεισμάτων έχει διαγνωστική αξία Τα αντιγόνα χλαμυδίων σε μολυσματικό υλικό ανιχνεύονται χρησιμοποιώντας άμεσες και έμμεσες αντιδράσεις ανοσοφθορισμού. Η ουσία της άμεσης μεθόδου είναι ο συνδυασμός σημασμένων με φθοριόχρωμα αντισώματα με χλαμυδιακό αντιγόνο και η ανίχνευση μιας συγκεκριμένης λάμψης σε μικροσκόπιο φθορισμού. Φωτεινός αντιχλαμυδιακός ορός παράγεται στο Kharkov. Υπάρχουν πολλά ξένα διαγνωστικά συστήματα για τη διεξαγωγή αυτής της μεθόδου. Η ουσία της έμμεσης μεθόδου είναι ο συνδυασμός του σύνθετου αντιγόνου + μη επισημασμένων χλαμυδιακών αντισωμάτων με ορό με σήμανση για το είδος (αντισφαιρίνη), εκτός από τις μικροσκοπικές μεθόδους, τα χλαμυδιακά αντιγόνα υλικό μπορεί να ανιχνευθεί χρησιμοποιώντας ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία. Η αρχή της μεθόδου είναι η αλληλεπίδραση μονοκλωνικών χλαμυδιακών αντισωμάτων που έχουν προσροφηθεί στη στερεά φάση με το χλαμυδιακό αντιγόνο που βρίσκεται στο υλικό δοκιμής και ο σχηματισμός ανοσοσυμπλεγμάτων. Το υλικό για ανάλυση μπορεί να είναι ξύσεις από βλεννογόνους, φυγοκέντρηση ούρων, εκκρίσεις, δείγματα βιοψίας κ.λπ. Πολλά συστήματα διαγνωστικών δοκιμών για ELISA έχουν ήδη αναπτυχθεί και τεθεί σε εφαρμογή. Το υλικό δοκιμής προστίθεται στα αντισώματα που έχουν προσροφηθεί στα φρεάτια. Τα αποτελέσματα αξιολογούνται χρησιμοποιώντας έναν αναλυτή ενζυμικής ανοσοδοκιμασίας σύμφωνα με τις οδηγίες για κάθε σύστημα δοκιμής. Η ευαισθησία του ELISA για την ανίχνευση χλαμυδίων κυμαίνεται από 50-70% στους άνδρες και 88-100% στις γυναίκες.Απομόνωση χλαμυδίων σε κυτταροκαλλιέργειες
Η πιο ακριβής και βασισμένη σε στοιχεία μέθοδος για τη διάγνωση των χλαμυδίων είναι η απομόνωση του παθογόνου σε κυτταροκαλλιέργεια (χρυσό πρότυπο). Οι πιο συχνά χρησιμοποιούμενες κυτταροκαλλιέργειες είναι οι L-929, McCoy, Hela και BHK-21. Σε αποστειρωμένα σωληνάρια με επίπεδο πυθμένα με διάμετρο 14 mm, τοποθετήστε καλυπτρίδες στο κάτω μέρος, προσθέστε 1 ml κυτταρικού εναιωρήματος σε θρεπτικό μέσο (1-105 κύτταρα / ml) και τοποθετήστε για 24-48 ώρες σε θερμοστάτη στους 37 ° C για να σχηματίσετε μια μονοστοιβάδα κελιών στις καλυπτρίδες. Στη συνέχεια, το μέσο χύνεται, προστίθεται μολυσματικό υλικό που έχει υποστεί επεξεργασία με αντιβιοτικά, φυγοκεντρείται για μία ώρα στις 3000 rpm, επωάζεται σε θερμοστάτη για 2 ώρες στους 37 ° C. Το υλικό δοκιμής χύνεται, αντικαθίσταται με φρέσκο θρεπτικό μέσο και επωάζεται σε θερμοστάτη για 48-72 ώρες. Τα καλυμμένα ποτήρια με μια μονοστοιβάδα κυττάρων αφαιρούνται, στερεώνονται για 10 λεπτά με μεθανόλη, πλένονται με ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών και χρωματίζονται με τη μέθοδο Romanowsky-Giemsa. Οι καλυπτρίδες τοποθετούνται σε μια γυάλινη πλάκα με μια μονοστοιβάδα κυττάρων στραμμένη προς τα κάτω στο βάλσαμο Καναδά. Τα στοιχειώδη σώματα των χλαμυδίων χρωματίζονται με κόκκινο χρώμα και τα δικτυωτά σώματα βάφονται μπλε Κατά την επεξεργασία σκευασμάτων με φθορίζοντα αντισώματα, μια μονοστιβάδα κυττάρων τοποθετείται επίσης σε μια γυάλινη πλάκα σε γλυκερίνη και εξετάζεται χρησιμοποιώντας ένα φθορίζον μικροσκόπιο. Η μέθοδος είναι ιδιαίτερα ειδική (100%) και ευαίσθητη (75%), αλλά αρκετά περίπλοκη, ακριβή, το αποτέλεσμα επιτυγχάνεται σε 72-96 ώρες. Επιπλέον, υπάρχει υψηλός κίνδυνος μόλυνσης του προσωπικού. Δεν είναι ακόμα άμεσα διαθέσιμο για πρακτικά εργαστήρια.Ανοσολογική διάγνωση
ΣΕ σύγχρονη πρακτική Οι ορολογικές μελέτες των ουρογεννητικών χλαμυδίων χρησιμοποιούν 4 ανοσολογικές αντιδράσεις: έμμεσο ανοσοφθορισμό, έμμεση αιμοσυγκόλληση, στερέωση συμπληρώματος και μέθοδο ενζυμικής ανοσοδοκιμασίας. Το υλικό για έρευνα και στις 4 αντιδράσεις είναι ο ορός του αίματος των ασθενών, οι εκκρίσεις των γονάδων Για την ανίχνευση χλαμυδιακών αντισωμάτων στην έμμεση αντίδραση ανοσοφθορισμού χρησιμοποιείται ένα ειδικό χλαμυδιακό αντιγόνο, το οποίο εξασφαλίζει αντιδράσεις με αντισώματα σε όλες τις παραλλαγές του C. trachomatis Όταν διεξάγεται αυτή η αντίδραση στο θέμα, τα αντιγόνα αντικειμένων παρασκευάζονται σε γυαλί. Το γυαλί τοποθετείται σε ένα στένσιλ που υποδεικνύει τις περιοχές εφαρμογής των αντιγόνων (ελέγχου και ειδικών). Οι αντικειμενοφόρες πλάκες ξηραίνονται για 15-20 λεπτά και στερεώνονται σε παγωμένη ακετόνη. Στη συνέχεια εφαρμόζονται κατάλληλες αραιώσεις ορού στα πλακίδια αντιγόνου και επωάζονται για 40 λεπτά στους 37 °C σε υγροποιημένο θάλαμο. Μετά από αυτό, το παρασκεύασμα πλένεται τρεις φορές με ένα ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών, προστίθεται ορός φωταύγειας κατά του είδους, διατηρείται σε υγρό θάλαμο για 40 λεπτά και πλένεται ξανά τρεις φορές. Οι αποξηραμένες αντικειμενοφόρες πλάκες εξετάζονται σε μικροσκόπιο φθορισμού. Η τεχνική για τη ρύθμιση της αντίδρασης πραγματοποιείται σύμφωνα με τις οδηγίες που επισυνάπτονται σε κάθε σύστημα διαγνωστικών δοκιμών. Ο τίτλος των χλαμυδιακών αντισωμάτων στον ορό του ασθενούς θεωρείται ότι είναι όσο μεγαλύτερη είναι η αραίωσή του, στην οποία παρατηρείται μια καθαρή φωτεινή πράσινη λάμψη τουλάχιστον 2+. Για χλαμυδιακές βλάβες του ουρογεννητικού συστήματος, είναι 1:64 ή υψηλότερο. Η δοκιμή RIF με τη μέθοδο των ζευγαρωμένων ορών θα πρέπει να αποκαλύψει αύξηση του τίτλου των αντισωμάτων κατά 4 φορές από το αρχικό επίπεδο την ανίχνευση αντισωμάτων στο ειδικό για το γένος αντιγόνο χλαμυδίων. Το έβαλαν με τον συνηθισμένο τρόπο. Η διάγνωση θεωρείται θετική όταν ο τίτλος των αντισωμάτων στερέωσης του συμπληρώματος είναι 1:64 ή μεγαλύτερος. Το RSC δεν είναι πολύ κατάλληλο για τη διάγνωση χλαμυδιακών λοιμώξεων του γεννητικού συστήματος Η ανίχνευση χλαμυδιακών αντισωμάτων με ενζυμική ανοσοδοκιμασία βασίζεται στην αλληλεπίδραση του αντιγόνου με τα χλαμύδια στην επιφάνεια των φρεατίων μιας πλάκας πολυστυρενίου με IgM και IgG στους ορούς των ασθενών. άνθρωποι. Ένας μεγάλος αριθμός διαγνωστικών κιτ έχει ήδη παραχθεί Αρχικά, ο ορός του ασθενούς αραιώνεται σε μια βοηθητική σειρά δοκιμαστικών σωλήνων και στη συνέχεια τα αντισώματα απορροφώνται στα φρεάτια μιας πλάκας μικροτιτλοδότησης. Η λεπτομερής διαδικασία για την πραγματοποίηση ELISA καθορίζεται στις οδηγίες που επισυνάπτονται στο σύστημα διαγνωστικών δοκιμών. Η ELISA συνιστάται να διενεργείται με χρήση ζευγαρωμένων ορών. Τα αποτελέσματα αξιολογούνται χρησιμοποιώντας έναν αναλυτή ενζυμικής ανοσοδοκιμασίας με βάση την οπτική πυκνότητα των διαλυμάτων στα φρεάτια μιας πλάκας πολυστυρενίου.25. Χλαμύδια. Ταξινομία παθογόνων ρικετσιών. Χαρακτηριστικά μορφολογίας και ανάπτυξης. Μέθοδοι ανίχνευσης.
Ταξινόμηση των χλαμυδίων
Βασίλειο:Προκαρυώτα
Τμήμα: Gracilicutes
Παραγγελία:Chlamydiales
Οικογένεια:Chlamydiaceae
Γένος:Χλαμύδια, Χλαμυδόφιλα
Διαφορά μεταξύ χλαμυδίων και αληθινών προκαρυωτών
Μικρά μεγέθη στοιχειωδών σωμάτων (εξωκυτταρικές μορφές) – 0,3-0,6-1,5 μικρά.
Μη προκαρυωτικός κύκλος αναπαραγωγής.
Μέθοδοι ανίχνευσης χλαμυδίων
Χρώση κατά Romanovsky-Giemsa. Χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των χλαμυδίων στο αρχικό και στο τελικό στάδιο του κύκλου. Εμφανίζονται μωβ στο μπλε κυτταρόπλασμα του κυττάρου.
Θεραπεία με τη μέθοδο ορών με σήμανση φθορίου – RIF.
Ανίχνευση ενδοκυτταρικών εγκλεισμάτων με τη μορφή παραπυρηνικών καλυμμάτων χρησιμοποιώντας κυτταρολογικές μεθόδους: Turevich, Muromtsev κ.λπ.
Χρώση κατά Gram - αρνητικό σε γραμμάρια (δεν χρησιμοποιείται στην πράξη).
26, 27. L-μετασχηματιστές. Χαρακτηριστικός. L-μορφές βακτηρίων. Μορφολογία, βιολογικές ιδιότητες.
Υπό την επίδραση διαφόρων παραγόντων - μεγάλο-μετασχηματιστές(παράγοντες που επάγουν τον μετασχηματισμό L) το κυτταρικό τοίχωμα μπορεί να καταστραφεί. Όταν καταστραφεί εντελώς, σχηματίζεται πρωτοπλάστες, σφαιροπλάστες ή μεγάλο - έντυπα . Σε αντίθεση με τους πρωτοπλάστες, οι μορφές L είναι ικανές να αναπαράγονται. Συμβαίνουν σταθερός, δηλαδή, δεν είναι σε θέση να αποκαταστήσουν το κυτταρικό τοίχωμα και ασταθής- επαναφορά στην αρχική του μορφή. Εάν το κυτταρικό τοίχωμα είναι μερικώς διαλυμένο, τότε σφαιροπλάστης, αν είναι εντελώς - πρωτοπλάστης.
Η εξαιρετική σημασία του L-μετασχηματισμού των παθογόνων βακτηρίων είναι ότι είναι κοινή αιτίαμετάβαση των οξέων μορφών ασθενειών σε χρόνιες μορφές και οι παροξύνσεις τους.
Παράγοντες που επάγουν τον μετασχηματισμό L:
Αντιβιοτικά που αναστέλλουν τη σύνθεση του κυτταρικού τοιχώματος (πενικιλλίνη, κεφαλοσπορίνη).
Ένζυμα (λυσοζύμη, αμιδάση);
Αντισώματα;
Ακτίνες Χ υπεριώδεις ακτίνες;
Υψηλές συγκεντρώσεις αμινοξέων (γλυκίνη, φαινυλαλανίνη).
Υπάρχουν διάφορες μορφολογικές παραλλαγές των L-μορφών βακτηρίων:
1) μεγάλα σφαιρικά σώματα (1-50 μm).
2) στοιχειώδη σώματα ή κόκκοι (0,6-0,7 μm).
3) μάζες χωρίς δομή που δεν έχουν σταθερό σχήμα και μέγεθος.
4) δομές που μοιάζουν με νήματα που ποικίλλουν σε μέγεθος (έως 150 μm).
5) φιλτραρόμενες φόρμες.
Οι μορφές L αναπαράγονται με δυαδική σχάση, χάνουν μεσοσώματα, η περιεκτικότητα σε αμινοξέα μειώνεται και η ποσότητα των λιπιδίων αυξάνεται. Οι μορφές L στερούνται πλήρως ή μερικώς κυτταρικού τοιχώματος. Ως αποτέλεσμα, συγκολλούνται ασθενώς ή καθόλου από συγκεκριμένους ορούς και δεν λύονται από συγκεκριμένους βακτηριοφάγους.
Μέθοδοι αναγνώρισης.
1. Έμμεση μέθοδος - βασίζεται στην ικανότητα των μορφών L να αποκαθιστούν (αναστρέφουν) τα γονικά χαρακτηριστικά. Η αναστροφή συμβαίνει όταν ο παράγοντας επαγωγής αποκλείεται από το περιβάλλον ή υπό την επίδραση μεταλλαξιγόνων - ακτίνες UV, πορτοκαλί ακριδίνης. Η μορφολογία των καλλιεργειών που επαναφέρονται αποκαθίσταται σταδιακά μετά από επαναλαμβανόμενη επανασπορά σε συμβατικά θρεπτικά μέσα.
2. Άμεση μέθοδος– βασίζεται στην αναγνώριση του τύπου των μορφών L με τον προσδιορισμό ειδικών αντιγόνων με ορολογικές αντιδράσεις, τη διαφοροποίηση των πρωτεϊνών με ηλεκτροφόρηση σε γέλη άγαρ και την καθιέρωση ομολογίας DNA σε παραλλαγές L και τις βακτηριακές τους μορφές.
| " |
Ταξινομία:τάξη Chlamydiales, οικογένεια Chlamydaceae, γένος Chlamydia. Το γένος αντιπροσωπεύεται από τα είδη C.trachomatis, C.psittaci, C.pneumoniae.
Chlamydia trachomatis ορότυποι D-K είναι ο κύριος αιτιολογικός παράγοντας των ουρογεννητικών χλαμυδίων.
Τα χλαμύδια είναι σε θέση να διεισδύσουν στο κύτταρο ξενιστή, να πολλαπλασιαστούν σε αυτό και να επιβιώσουν κατά τη μετάβαση από το κύτταρο στο περικυτταρικό περιβάλλον. Οι ανοσολογικές διεργασίες διαδραματίζουν ιδιαίτερο ρόλο στην ανάπτυξη της νόσου που προκαλείται από λοίμωξη από χλαμύδια.
Οι νέες φλεγμονές αυξάνουν τον βαθμό της ανοσολογικής απόκρισης του ξενιστή και τον βαθμό της παθολογικής βλάβης.
Η επιμονή υπό την επίδραση εξωτερικών παραγόντων είναι μια απόκλιση από τον κύκλο ανάπτυξης που είναι χαρακτηριστικός των χλαμυδίων. Η απόκλιση εκφράζεται σε επιβράδυνση του κύκλου ανάπτυξης, η οποία προκαλείται από διαφορές στις συνθήκες περιβάλλοαπό τις τυπικές συνθήκες που παρατηρούνται κατά την καλλιέργεια κυττάρων.
Η συνεχής παρουσία αυτών των μικροοργανισμών μέσα στο κύτταρο ξενιστή (επιμονή), όταν δεν ανιχνεύεται η ανάπτυξή τους, θεωρείται ο κύριος παράγοντας στην παθογένεση της χλαμυδιακής μόλυνσης.
Λόγω των χαρακτηριστικών των χλαμυδίων, τα αντιβακτηριακά φάρμακα εναντίον τους συχνά δεν είναι τόσο αποτελεσματικά όσο κατά των συνηθισμένων βακτηρίων, επομένως η θεραπεία των χλαμυδίων είναι πιο περίπλοκη και χρονοβόρα.
Οι ασθένειες που προκαλούνται από χλαμύδια ονομάζονται χλαμύδια. Ασθένειες που προκαλούνται από C. trachomatisΚαι C. pneumoniae- ανθρωπόπονες. Ορνίθωση, ο αιτιολογικός παράγοντας της οποίας είναι S. psittaci,-ζωοανθρωπονωτική λοίμωξη.
Μορφολογία χλαμυδίων: μικρά, gram-αρνητικά βακτήρια, σφαιρικού σχήματος. Δεν σχηματίζουν σπόρια, δεν υπάρχουν μαστίγια ή κάψουλες. Κυτταρικό τοίχωμα: Μεμβράνη 2 στρώσεων. Έχουν γλυκολιπίδια. Σύμφωνα με το Gram - κόκκινο. Η κύρια μέθοδος χρώσης είναι η Romanovsky-Giemsa.
2 μορφές ύπαρξης: στοιχειώδη σώματα (ανενεργά μολυσματικά σωματίδια, έξω από το κύτταρο). δικτυωτά σώματα (εσωτερικά κύτταρα, βλαστική μορφή).
Καλλιέργεια:Μπορεί να πολλαπλασιαστεί μόνο σε ζωντανά κύτταρα. Στον σάκο κρόκου των αναπτυσσόμενων εμβρύων κοτόπουλου, στο σώμα των ευαίσθητων ζώων και στην κυτταροκαλλιέργεια
Ενζυμική δραστηριότητα: μικρό. Ζυμώνουν το πυροσταφυλικό οξύ και συνθέτουν λιπίδια. Δεν είναι σε θέση να συνθέσουν ενώσεις υψηλής ενέργειας.
Αντιγονική δομή: Αντιγόνα τριών τύπων: ειδικός για το γένος θερμοσταθερός λιποπολυσακχαρίτης (στο κυτταρικό τοίχωμα). Εντοπίστηκε με χρήση RSC. ειδικό για είδος αντιγόνο πρωτεϊνικής φύσης (στην εξωτερική μεμβράνη). Εντοπίστηκε με χρήση RIF. ειδικό για παραλλαγή αντιγόνο πρωτεϊνικής φύσης.
Παράγοντες παθογένειας.Οι πρωτεΐνες της εξωτερικής μεμβράνης των χλαμυδίων συνδέονται με τις συγκολλητικές τους ιδιότητες. Αυτές οι συγκολλητικές ουσίες βρίσκονται μόνο σε στοιχειώδη σώματα. Τα χλαμύδια παράγουν ενδοτοξίνη. Πρωτεΐνη θερμικού σοκ που βρίσκεται σε ορισμένα χλαμύδια , ικανό να προκαλέσει αυτοάνοσες αντιδράσεις.
Αντίσταση. Υψηλό σε διάφορους περιβαλλοντικούς παράγοντες. Ανθεκτικό σε χαμηλές θερμοκρασίες και στέγνωμα. Ευαίσθητο στη θερμότητα.
Ο επιπολασμός της λοίμωξης, σύμφωνα με διάφορες πηγές, είναι έως και 60% στις γυναίκες και έως και 51% στους άνδρες που πάσχουν από φλεγμονώδεις ασθένειες του ουρογεννητικού συστήματος.
Τα χλαμύδια χαρακτηρίζονται από έναν μοναδικό κύκλο ανάπτυξης: οι κύριες μορφολογικές μορφές είναι τα στοιχειώδη σώματα (EB) και τα δικτυωτά σώματα (RT). Το ET είναι μια ώριμη μορφή του παθογόνου, προσαρμοσμένη στην εξωκυτταρική ύπαρξη και μη ευαίσθητη στα αντιβιοτικά. Η RT είναι μια μη μολυσματική μορφή ενδοκυτταρικής ύπαρξης, που σχηματίζεται κατά τη διαδικασία της αναπαραγωγής και επιδέχεται τη δράση των αντιβιοτικών.
Λόγω της κυκλικής αναπαραγωγής του παθογόνου και της ικανότητάς του να επιμένει στα κύτταρα για μεγάλο χρονικό διάστημα, η ασθένεια είναι επιρρεπής σε χρονιότητα και υποτροπιάζουσα πορεία, πολυμορφισμό κλινικών εκδηλώσεων και, ως αποτέλεσμα, δυσκολίες στη διάγνωση και θεραπεία. Η χρόνια λοίμωξη από χλαμύδια οδηγεί σε σοβαρές επιπλοκές, όπως αναπαραγωγική δυσλειτουργία, λοίμωξη του εμβρύου πριν και εντός του τοκετού, σύνδρομο Reiter κ.λπ.
Λόγω της ασάφειας και της μη παθογνωμονικής φύσης των κλινικών εκδηλώσεων, μαζί με την αξιολόγηση και την εξέταση της αναμνησίας, οι εργαστηριακές μέθοδοι είναι υψίστης σημασίας για τη διάγνωση των χλαμυδίων.
Η διάγνωση PCR των χλαμυδίων βασίζεται στην ταυτοποίηση του γενετικού υλικού του παθογόνου (ανιχνεύσιμα θραύσματα - τομές της κρυπτικής πλασμιδικής αλληλουχίας γονιδίου C.trachomatis) σε βιολογικό υλικό.
Τα πλεονεκτήματα της μεθόδου είναι:
Δυνατότητα χρήσης ποικιλίας βιολογικού υλικού ανάλογα με τη θέση του αναμενόμενου εντοπισμού του παθογόνου.
ταυτοποίηση γενετικού υλικού σε μικρή ποσότητα δείγματος·
λόγω της υψηλής ευαισθησίας και ειδικότητας, της δυνατότητας έγκαιρης διάγνωσης ασθενειών και ανίχνευσης ασυμπτωματικών μορφών μόλυνσης.
οι απαιτήσεις για τη συλλογή δειγμάτων βιολογικού υλικού, καθώς και οι συνθήκες αποθήκευσης και μεταφοράς τους, απλοποιούνται σημαντικά σε σύγκριση με τη βακτηριολογική μέθοδο, καθώς δεν υπάρχει ανάγκη να διατηρηθεί ζωντανό το παθογόνο.
ταχύτητα ανάλυσης.
Το γένος Chlamydia, οικογένεια Chlamydiaceae, τάξης Chlamydiales περιλαμβάνει τους αιτιολογικούς παράγοντες του τραχώματος, της επιπεφυκίτιδας (βλεννόρροια με εγκλείσματα), της βουβωνικής λεμφοκοκκιωμάτωσης (νόσος Nicola-Favre), της ορνίθωσης. περιέχουν DNA και RNA, νουκλεοπρωτεΐνες, λιπίδια, υδατάνθρακες.
Στον κύκλο ανάπτυξης των χλαμυδίων, παρατηρούνται τρία στάδια: 1) μικρά (0,2-0,4 μικρά) στοιχειώδη σώματα που περιβάλλονται από τοίχο τριών στρωμάτων, τα οποία διατηρούνται σε συμπαγή κατάσταση. γενετικό υλικόνουκλεοειδή και ριβοσώματα. 2) Πρωτεύοντα σώματα, μεγάλα (0,8-1,5 μm), έχουν νουκλεοειδή ινίδια και ριβοσωματικά στοιχεία, καλύπτονται με λεπτό τοίχωμα, πολλαπλασιάζονται με σχάση. Τα θυγατρικά κύτταρα αναδιοργανώνονται σε στοιχειώδη σώματα, τα οποία μπορούν να είναι εξωκυτταρικά και να διεισδύσουν σε άλλα κύτταρα. 3) ενδιάμεσο (μεταβατικό) στάδιο μεταξύ πρωτοβάθμιων και στοιχειωδών σωμάτων. Μικρό
Τα (στοιχειώδη) σώματα έχουν μολυσματικές ιδιότητες, τα μεγάλα (πρωτογενή) σώματα εκτελούν βλαστική λειτουργία, η ανάπτυξη, η αναπαραγωγή και η ωρίμανση των χλαμυδίων ολοκληρώνονται μέσα σε 40 ώρες.
Οι πίθηκοι είναι ευαίσθητοι στον αιτιολογικό παράγοντα του τραχώματος όταν μολυνθούν στον επιπεφυκότα, αναπτύσσεται πειραματικό τράχωμα, παρόμοιο με τη νόσο στους ανθρώπους. ορισμένα στελέχη μπορούν να πολλαπλασιαστούν στους πνεύμονες των ποντικών και ινδικά χοιρίδια, μολυνθεί ενδορινικά, καθώς και κατά την υποδόρια μόλυνση ινδικών χοιριδίων και ενδοεγκεφαλικά σε ποντίκια. Η δεξαμενή του παθογόνου είναι ο άνθρωπος. Η ασθένεια στον άνθρωπο συνοδεύεται από βλεφαροκερατοεπιπεφυκίτιδα. Οι ασθενείς αναπτύσσουν χρόνια φλεγμονή της συνδετικής μεμβράνης των ματιών, υπερπλασία ιστών και υπερτροφία ωοθυλακίων που μοιάζουν με διαφανείς κόκκους. Σε σοβαρές περιπτώσεις, λόγω υπερτροφίας των ωοθυλακίων, ο επιπεφυκότας έχει την εμφάνιση ωαρίων βατράχου. Στη συνέχεια, εμφανίζονται ουλές των ωοθυλακίων.
Το τράχωμα μεταδίδεται με την επαφή με ασθενείς μέσω πετσέτας, βρώμικων χεριών, κατά το πλύσιμο σε κοινή λεκάνη, καθώς και με μύγες.
Η εργαστηριακή διάγνωση πραγματοποιείται με την ανίχνευση εγκλεισμάτων στα επιθηλιακά κύτταρα του επιπεφυκότα.
Η θεραπεία πραγματοποιείται με επιτυχία με αντιβιοτικά (τετρακυκλίνες, ερυθρομυκίνη) και σουλφοναμιδικά φάρμακα.
Η πρόληψη περιλαμβάνει τον έγκαιρο εντοπισμό και την ολοκληρωμένη θεραπεία των ασθενών, τις υπηρεσίες ιατροφαρμακευτικής περίθαλψης για εστίες, τη βελτίωση των συνθηκών εργασίας και διαβίωσης και τη βελτίωση του υλικού και πολιτιστικού επιπέδου του πληθυσμού. Πολύ υψηλή συχνότητα τραχώματος παρατηρείται στην Ινδία και σε άλλες ασιατικές χώρες και στην Αφρική. Το τράχωμα επηρεάζει 400-500 εκατομμύρια ανθρώπους που ζουν σε αναπτυσσόμενες χώρες; είναι η κύρια αιτία τύφλωσης.
Η επιπεφυκίτιδα των νεογνών ή η βλενόρροια με εγκλείσματα προκαλείται από Chl.trachomatis (Εικ. 116.9), η νόσος εμφανίζεται με συμπτώματα διήθησης του επιπεφυκότα, ιδιαίτερα του κάτω βλεφάρου. Η διάρκεια της οξείας φάσης είναι 10-15 ημέρες, αλλά η αισθητή διήθηση παραμένει για 2-3 μήνες ή περισσότερο. Πηγή μόλυνσης είναι οι μητέρες, στις οποίες το παθογόνο επιμένει στο ουρογεννητικό σύστημα και μεταδίδεται κατά τον τοκετό στα νεογέννητα παιδιά. Οι ενήλικες μολύνονται κολυμπώντας σε μικρές λίμνες και μη χλωριωμένες πισίνες. Η ασθένεια εκδηλώνεται με τη μορφή οξείας ωοθυλακικής επιπεφυκίτιδας και διαρκεί περίπου ένα χρόνο. Η θεραπεία πραγματοποιείται με σουλφοναμιδικά φάρμακα και αντιβιοτικά. Η χορήγηση νιτρικού αργύρου για την πρόληψη της γονόρροιας δεν αποτρέπει την έγκλειστη επιπεφυκίτιδα.
Ο αιτιολογικός παράγοντας της αφροδίσιας λεμφοκοκκιωμάτωσης είναι το Chl.trachomatis. Η ασθένεια μεταδίδεται σεξουαλικά και εμφανίζεται σε ζεστές υποτροπικές χώρες. Δεν υπάρχουν κρούσματα της νόσου στην ΕΣΣΔ. Αυτός ο μικροοργανισμός μπορεί επίσης να προκαλέσει ουρηθρίτιδα, πρωκτίτιδα και αρθρίτιδα.
Η εργαστηριακή διάγνωση πραγματοποιείται με τη χρήση μικροσκοπίας με επεξεργασία των επιχρισμάτων Romanovsky-Giemsa. Η αντίδραση στερέωσης του συμπληρώματος και το τεστ αλλεργίας έχουν διαγνωστική σημασία. Χρησιμοποιούν ενδοεγκεφαλική μόλυνση λευκών ποντικών, που αναπτύσσουν μηνιγγίτιδα με θανατηφόρο κατάληξη.
Θεραπεία. Χρησιμοποιούνται τετρακυκλίνες, πενικιλίνη και σουλφα φάρμακα.
Ο αιτιολογικός παράγοντας της ορνίθωσης - Chl.psittaci - προκαλεί ασθένειες σε πολλά είδη πτηνών. Το παθογόνο ανακαλύφθηκε το 1933 από τον K. Manner.
Η μορφολογία και η μέθοδος αναπαραγωγής είναι ίδια με αυτές ολόκληρου του γένους Syatus. Σε επιχρίσματα δακτυλικών αποτυπωμάτων ή τομές από όργανα, οι μικροοργανισμοί εντοπίζονται με τη μορφή συστάδων που περιβάλλονται από μια φυσαλιδώδη μεμβράνη. Μπορούν να ανιχνευθούν με χρώση Romanovsky-Giemsa, στα κύτταρα του συστήματος λεμφοειδών-μακροφάγων ή εξωκυτταρικά όταν υποστούν ρήξη (βλ. Εικ. 116.4). Η περιεκτικότητα σε G+C στο νουκλεοειδές DNA είναι 39-45%. Τα χλαμύδια αναπτύσσονται στον σάκο κρόκου εμβρύων κοτόπουλου ή στο σώμα λευκών ποντικών, καθώς και σε ιστοκαλλιέργεια και κύτταρα όγκου στους 39°C.
Τα χλαμύδια έχουν δύο αντιγόνα: σταθερό στη θερμότητα, το οποίο είναι κοινό στην ομάδα ορνίθωσης-ψιττάκωσης-λεμφοκοκκιωμάτωσης και ασταθές στη θερμότητα, που καταστρέφονται στους 60°C και περιέχουν μια πρωτεϊνική ουσία.
Η αντίσταση είναι πολύ υψηλή. Τα χλαμύδια παραμένουν ζωντανά για 2 χρόνια σε θερμοκρασία -70° C. Ο μολυσμένος ιστός στους 4° C συνεχίζει να είναι μολυσματικός για αρκετές εβδομάδες. Η θέρμανση σε θερμοκρασία 60-70° C σκοτώνει τα χλαμύδια μέσα σε 10-15 λεπτά. Ευαίσθητο στη δράση των συμβατικών απολυμαντικών διαλυμάτων (χλωραμίνη).
Περισσότερα από 100 είδη άγριων και οικόσιτων πτηνών (παπαγάλοι, περιστέρια, κοτόπουλα κ.λπ.), καθώς και λευκά ποντίκια, αρουραίοι, ινδικά χοιρίδια, κουνέλια και μαϊμούδες, είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα στο παθογόνο της ορνίθωσης. Διάφορα στελέχη Chl.psittaci προκαλούν ψιττάκωση, ορνίθωση, πνευμονία σε μοσχάρια, πρόβατα, κατσίκες, χοίρους, άλογα. πολυαρθρίτιδα σε πρόβατα, μοσχάρια, χοίρους. πλακεντίτιδα και αποβολή σε μοσχάρια και πρόβατα. εντερίτιδα σε μόσχους? επιπεφυκίτιδα σε ινδικά χοιρίδια, μοσχάρια και πρόβατα. εγκεφαλίτιδα σε μαρσιποφόρους αρουραίους και εγκεφαλομυελίτιδα σε μόσχους. Στους παπαγάλους η ασθένεια χαρακτηρίζεται από καταρροή, εντερίτιδα, εξουθενωτική διάρροια και συνήθως καταλήγει σε θάνατο. Ασθένειες παρατηρούνται σε Νότια Αμερική, Αυστραλία και άλλες χώρες.
Το παθογόνο που έχει εισέλθει στο ανθρώπινο σώμα εισέρχεται στο αίμα και προκαλεί βακτηριαιμία, η οποία συνεχίζεται στο | για μια εβδομάδα, και μερικές φορές περισσότερο. Στους ιστούς και τα όργανα I, το παθογόνο διέρχεται από πολύπλοκους κύκλους που προκαλούν διαταραχή του κυτταρικού μεταβολισμού, ανάπτυξη μέθης και αλλεργίες. Η ορνίθωση χαρακτηρίζεται από την εμφάνιση πνευμονικής εστίας χωρίς δύσπνοια, βήχα και πόνο στο στήθος. Στο αποκορύφωμα της νόσου, μια ακτινογραφία αποκαλύπτει εικόνα περιθωριακής λοβιακής βρογχοπνευμονίας. Η απορρόφηση του εξιδρώματος γίνεται αργά.
Πηγές μόλυνσης είναι πτηνά (ασθενείς ή μεταφορείς), οικόσιτα και άγρια περιστέρια, πάπιες, κοτόπουλα, γαλοπούλες. Τα ενήλικα πτηνά αναρρώνουν, τα νεαρά πουλιά πεθαίνουν σε μεγάλο ποσοστό των περιπτώσεων. Το παθογόνο απεκκρίνεται με περιττώματα, από τα οποία μολύνονται υγιή πτηνά και άνθρωποι. Η μόλυνση των ζώων είναι δυνατή στη μήτρα, μέσω σεξουαλικής επαφής και δαγκωμάτων από έντομα που ρουφούν το αίμα.
Ένα άτομο συνήθως μολύνεται αερογενώς εισπνέοντας μολυσμένη σκόνη ή χνούδι, καθώς και όταν κόβει πτηνά, καθαρίζει κλουβιά και φροντίζει πτηνά, κάτι που συνοδεύεται από μόλυνση των χεριών και επαφή του παθογόνου με τους βλεννογόνους. Δεν μπορεί να αποκλειστεί η πιθανότητα μόλυνσης από άρρωστα άτομα από αερομεταφερόμενα σταγονίδια.
Η ανοσία μετά από ασθένεια είναι σχετική και βραχύβια. Έχουν αναφερθεί επαναλαμβανόμενες ασθένειες, ειδικά μεταξύ των εργαζομένων στο εργαστήριο. Ο αμυντικός μηχανισμός του οργανισμού σχετίζεται με την παρουσία αντισωμάτων.
Εργαστηριακή διάγνωση. Το παθογόνο ανιχνεύεται τις πρώτες ημέρες της νόσου στα πτύελα και στο αίμα. Παραμένει στο αίμα μέχρι την 5η-7η μέρα, στα πτύελα μέχρι την 21η ημέρα της ασθένειας. Η μέγιστη διάρκεια απομόνωσης των χλαμυδίων από τα πτύελα σημειώθηκε ότι ήταν 8 χρόνια. Κατά την εξέταση του υλικού της αυτοψίας, ο μικροοργανισμός απομονώθηκε από πνευμονικό ιστό, σπλήνα και εξίδρωμα. Για την αναγνώριση της ψιτάκωσης, χρησιμοποιείται η μικροσκόπηση και η αντίδραση στερέωσης του συμπληρώματος με ζευγαρωμένους ορούς (στην αρχή και στο τέλος της νόσου).
Τα χλαμύδια μπορούν να απομονωθούν από το αίμα και τα πτύελα ασθενών με ενδοεγκεφαλική μόλυνση λευκών ποντικών. Το παθογόνο μπορεί να ανιχνευθεί σε επιχρίσματα από σπλήνα, ήπαρ και σε τμήματα εγκεφάλου πειραματόζωων που έχουν μολυνθεί ενδοπεριτοναϊκά. Η απομόνωση του παθογόνου είναι επίσης δυνατή όταν τα έμβρυα κοτόπουλου έχουν μολυνθεί στον σάκο του κρόκου. Καλό αποτέλεσμαδίνει αλλεργικό τεστ με ορνιθίνη και τη μέθοδο του φθορισμού.
Θεραπεία. Συνταγογραφούνται τετρακυκλίνες και στρεπτομυκίνη. Για χρόνιες μορφές, συνιστάται εμβολιοθεραπεία.
Πρόληψη. Επιτυγχάνεται με διαδοχικά μέτρα: έγκαιρη διάγνωση, απομόνωση και νοσηλεία ασθενών σε νοσοκομεία μολυσματικών νοσημάτων (σε ξεχωριστούς θαλάμους ή κουτιά). Το προσωπικό χειρισμού πρέπει να φορά μάσκες και να απολυμαίνει τακτικά τα χέρια του με διάλυμα χλωραμίνης 0,5%.
Πίνακας 1.
|
Οροί χλαμυδίων |
Ασθένειες |
||
|
Τράχωμα Αφροδίσιο λεμφοκοκκίωμα (LGV) |
Α, Β, Β α, Γ |
Τράχωμα και παράτραχωμα |
|
|
Chlamydia trachomatis |
Από το Δ στο Κ L, L 2 , L 2 a , L 3 |
Ουρογεννητικά χλαμύδια και πνευμονία νεογνών Αφροδίσιο λεμφοκοκκίωμα |
|
|
Chlamydia psittaci |
8 (1 U) οροί |
Ορνίθωση (ψιττάκωση) |
|
|
Chlamydia pneumoniae |
TWAR, AR, RF, CWL |
Πνευμονία, οξείες αναπνευστικές λοιμώξεις, αθηροσκλήρωση, σαρκοείδωση, βρογχικό άσθμα |
Χλαμύδια (οικογένεια Chlamydiaceae)
Ταξινομική θέση. Τα χλαμύδια ανήκουν στην τάξη Chlamydiales, οικογένεια Chlamydaceae, οικογένεια Χλαμύδια. Υπάρχουν τρεις τύποι χλαμυδίων - ΜΕ.τραχωμάτης, ΜΕ.psittaci, ΜΕ.pneumoniae, – πρόκληση ασθενειών σε ανθρώπους, ζώα, καθώς και σε πολλά είδη που είναι παθογόνα μόνο για τα ζώα (π.χ. , S. resogit, S.abortus, ντο. felisκαι τα λοιπά.). Η ταξινόμηση των παθογόνων χλαμυδίων για τον άνθρωπο παρουσιάζεται στον πίνακα. 1
Σύμφωνα με την τελευταία ταξινόμηση, η οικογένεια Chlamydaceaeπροτείνεται να χωριστεί σε δύο γένη: το γένος Chlamydia, που αντιπροσωπεύεται από το είδος ΜΕ.τραχωμάτηςκαι το φύλο Χλαμιδόφιλα, που περιλαμβάνει είδη ΜΕ.psittaciΚαι ΜΕ.pneumoniae.
Τα κύρια στάδια του κύκλου ζωής των χλαμυδίων:
1) στοιχειώδη σώματα – μικρές (0,2-0,5 μm) σφαιρικές δομές πυκνότητας ηλεκτρονίων με συμπαγές νουκλεοειδές και άκαμπτο κυτταρικό τοίχωμα τριών στρωμάτων.
2) αρχικά (πρωτότυπα) ή δικτυωτά σώματα– μεγάλοι (0,8-1,5 μm σε διάμετρο) σφαιρικοί σχηματισμοί με δομή πλέγματος με λεπτό κυτταρικό τοίχωμα και ινιδωτό νουκλεοειδές.
3) ενδιάμεσα σώματα– ένα ενδιάμεσο στάδιο μεταξύ στοιχειωδών και δικτυωτών σωμάτων.
Στοιχειώδη σώματαείναι μολυσματικές και δικτυωτές είναι η βλαστική μορφή των χλαμυδίων. Οι φυτικές μορφές αναπαράγονται με δυαδική σχάση ενδοκυτταρικά αλλά δεν είναι μολυσματικές όταν απελευθερώνονται από το κύτταρο ξενιστή. Ο κύκλος ζωής των χλαμυδίων ξεκινά με το γεγονός ότι τα στοιχειώδη σώματα φαγοκυτταρώνονται από το κύτταρο ξενιστή και στη συνέχεια μέσα σε λίγες ώρες αναδιοργανώνονται, αυξάνονται σε μέγεθος και μετατρέπονται σε δικτυωτές μορφές που πολλαπλασιάζονται με εγκάρσια διαίρεση. Οι προκύπτουσες θυγατρικές μορφές αναπαράγονται επίσης με δυαδική σχάση. Ο κύκλος ζωής τελειώνει όταν οι αναδυόμενες ενδιάμεσες μορφές αναδιοργανώνονται (συμπυκνώνονται), μειώνονται σε μέγεθος και μετατρέπονται σε στοιχειώδη σώματα. Τα χλαμύδια, που αναπαράγονται μέσα σε κυτταροπλασματικά κυστίδια, σχηματίζουν μικροαποικίες που περιβάλλονται από μια μεμβράνη που προέρχεται από την εισβολή της κυτταρικής μεμβράνης κατά τη διάρκεια της φαγοκυττάρωσης του στοιχειώδους σώματος. Και τα 3 στάδια ανάπτυξης των χλαμυδίων βρίσκονται σε μικροαποικίες. Σε ένα κύτταρο μπορεί να σχηματιστούν πολλές μικροαποικίες σε περίπτωση φαγοκυττάρωσης πολλών στοιχειωδών σωμάτων. Μετά τη ρήξη του τοιχώματος των κυστιδίων και της κυτταρικής μεμβράνης του ξενιστή, τα νεοσχηματισμένα χλαμύδια απελευθερώνονται και τα στοιχειώδη σώματα, μολύνοντας άλλα κύτταρα, επαναλαμβάνουν τον κύκλο ανάπτυξης. Για τη μικροσκοπική ανίχνευση των χλαμυδίων σε μολυσμένα κύτταρα (ιστούς), χρησιμοποιούνται διάφορες μέθοδοι χρώσης: Romanovsky-Giemsa, Castenada, Macchiavello κ.λπ. Όταν χρωματίζονται σύμφωνα με Romanovsky-Giemsa, αποκτούν μπλε ή μοβ χρώμα. Ωστόσο, τα χλαμύδια είναι καθαρά ορατά ακόμη και σε μη χρωματισμένη κατάσταση κατά τη μικροσκόπηση υγρών παρασκευασμάτων κάτω από γυαλί χρησιμοποιώντας ένα οπτικό σύστημα αντίθεσης φάσης. Υπό βέλτιστες συνθήκες ανάπτυξης σε ευκαρυωτικά κύτταρα κύκλος ζωήςΤα χλαμύδια είναι 17-40 ώρες Τα χλαμύδια αναπαράγονται καλά στον σάκο κρόκου των εμβρύων κοτόπουλου σε θερμοκρασίες από 33 έως 41 ° C (ανάλογα με το είδος), καθώς και σε κυτταροκαλλιέργειες διαφόρων σπονδυλωτών. Η περιεκτικότητα σε G+C στο DNA των χλαμυδίων κυμαίνεται από 39 έως 45 mol%, η αναλογία RNA/DNA στα στοιχειώδη σώματα είναι 2 φορές μικρότερη από ότι στα δικτυωτά σώματα. Το C. trachomatis έχει δύο σημαντικά μεταβολικά χαρακτηριστικά: την ικανότητα σύνθεσης προδρόμων γλυκογόνου και φολικού οξέος, με την οποία (λαμβάνοντας υπόψη άλλα χαρακτηριστικά) διαφοροποιούνται εύκολα από άλλα είδη - C. psittaci και C. pneumoniae (Πίνακας 2).
Διαφορικά χαρακτηριστικά των τριών τύπων Χλαμύδια
Πίνακας 2
|
Chlamydia trachomatis |
Chlamydia psittaci |
Chlamydia pneumoniae |
|
1. Το σχήμα των στοιχειωδών σωμάτων είναι σφαιρικό 2. Οι ενδοκυτταρικές αποικίες είναι συνήθως συμπαγείς. Τα χλαμύδια συνθέτουν γλυκογόνο, το οποίο ανιχνεύεται με τεστ ιωδίου 3. Τα χλαμύδια συνθέτουν βασικές πρόδρομες ουσίες του φολικού οξέος, έτσι η αναπαραγωγή τους σε έμβρυα κοτόπουλου καταστέλλεται από σουλφαδιαζίνη (1 mg/έμβρυο) 4. Ο βαθμός υβριδοποίησης του DNA με στελέχη C. psittaci και C. pneumoniae δεν υπερβαίνει το 10% |
1. Το σχήμα των στοιχειωδών σωμάτων είναι σφαιρικό 2. Οι μικροαποικίες στο εσωτερικό των κυττάρων είναι λιγότερο συμπαγείς και τα χλαμύδια βρίσκονται συχνά σε όλο το κυτταρόπλασμα και δεν σχηματίζουν γλυκογόνο 3. Τα χλαμύδια δεν συνθέτουν πρόδρομες ουσίες φυλλικού οξέος, επομένως η ανάπτυξή τους στον σάκο κρόκου των εμβρύων κοτόπουλου δεν καταστέλλεται από τη σουλφαδιαζίνη (1 mg/έμβρυο) 4. Ο βαθμός υβριδοποίησης του DNA με στελέχη C. trachomatis και C. pneumoniae δεν υπερβαίνει το 10% |
1. Το σχήμα των στοιχειωδών σωμάτων έχει σχήμα αχλαδιού 2. Οι ενδοκυτταρικές αποικίες είναι παρόμοιες με τις μικροαποικίες του C. psittaci, τα χλαμύδια δεν συνθέτουν γλυκογόνο 3. Τα χλαμύδια δεν συνθέτουν πρόδρομες ουσίες φυλλικού οξέος, επομένως δεν είναι ευαίσθητα στη σουλφαδιαζίνη. Τα έμβρυα κοτόπουλου δεν αναπτύσσονται καλά 4. Ο βαθμός υβριδισμού του DNA με στελέχη C. trachomatis και C. psittaci δεν υπερβαίνει το 10% |
Μορφολογικές και χρωστικές ιδιότητες. Τα χλαμύδια είναι μικρά gram-αρνητικά βακτήρια με σφαιρικό ή ωοειδές σχήμα. Δεν σχηματίζουν σπόρια και δεν έχουν μαστίγια ή κάψουλες.
Η δομή του κυτταρικού τοιχώματος των Chlamydia διαφέρει από τα άλλα βακτήρια: είναι μια μεμβράνη δύο στρωμάτων που οριοθετεί τον περιπλασματικό χώρο και δεν περιέχει (ή περιέχει σε μικρές ποσότητες) Ν-ακετυλομουραμικό οξύ, το κύριο συστατικό της πεπτιδογλυκάνης. Η ακαμψία του κυτταρικού τοιχώματος δίνεται από πεπτίδια που διασυνδέονται με πεπτιδικές γέφυρες. Διαφορετικά, τα χλαμύδια είναι παρόμοια με άλλα gram-αρνητικά βακτήρια. Έχουν γλυκολιπίδια παρόμοια με το LPS της εξωτερικής μεμβράνης του κυτταρικού τοιχώματος των gram-αρνητικών βακτηρίων και όταν χρωματίζονται με Gram αποκτούν κόκκινο χρώμα. Η κύρια μέθοδος για τον εντοπισμό των χλαμυδίων είναι η μέθοδος χρώσης Romanovsky-Giemsa.
Τα χλαμύδια είναι πολυμορφικά, γεγονός που οφείλεται στα χαρακτηριστικά της αναπαραγωγής τους. Ο μοναδικός κύκλος ανάπτυξης των χλαμυδίων χαρακτηρίζεται από την εναλλαγή δύο διαφορετικών μορφών ύπαρξης - στοιχειώδης Και δικτυωτός (ή αρχικά) σώματα.
Στοιχειώδη σώματαείναι μικρά (μέγεθος 0,2-0,3 microns) μεταβολικά ανενεργά μολυσματικά σωματίδια που βρίσκονται έξω από το κύτταρο. Έχουν ένα παχύ κέλυφος που αποτελείται από εσωτερικές και εξωτερικές μεμβράνες, γεγονός που καθορίζει τη σχετικά υψηλή αντοχή τους σε δυσμενείς περιβαλλοντικές συνθήκες. Τα στοιχειώδη σώματα βάφονται κόκκινα σύμφωνα με τον Romanovsky-Giemsa. Μέσα στα κύτταρα τα στοιχειώδη μετατρέπονται σε δικτυωτά σώματα.
Δίκτυα σώματαείναι βλαστική μορφή χλαμυδίων, έχουν συνήθως ωοειδές σχήμα και είναι αρκετές φορές μεγαλύτερα από τα στοιχειώδη σώματα (το μέγεθός τους είναι 0,4+0,6x0,8-5-1,2 μικρά). Βρίσκονται ενδοκυτταρικά κοντά στον πυρήνα και βάφονται σύμφωνα με τον Romanovsky-Giemsa σε μπλε ή βιολετί. Η μολυσματικότητα των δικτυωτών σωμάτων είναι εξαιρετικά χαμηλή σε σύγκριση με τα στοιχειώδη.
Μέσα στα κύτταρα, τα στοιχειώδη σώματα μετατρέπονται σε δικτυωτά σώματα, τα οποία, με τη σειρά τους, διαιρούνται επανειλημμένα με δυαδική σχάση, στη συνέχεια συμπυκνώνονται και μετατρέπονται σε στοιχειώδη σώματα. Στο τέλος του κύκλου, οι τελευταίοι καταλαμβάνουν το μεγαλύτερο μέρος του κυττάρου ξενιστή. Τεντώνοντας το τοίχωμα του κενοτοπίου το σκίζουν και μετά την πλασματική μεμβράνη του κυττάρου. Ο κύκλος ανάπτυξης των χλαμυδίων διαρκεί 24–48 ώρες και τελειώνει με το θάνατο του κυττάρου ξενιστή και την απελευθέρωση στοιχειωδών σωμάτων. Τα τελευταία, όταν απελευθερώνονται, μολύνουν γειτονικά άθικτα κύτταρα και ο κύκλος επαναλαμβάνεται.
Τα χλαμύδια καλλιεργούνται στον σάκο κρόκου των αναπτυσσόμενων εμβρύων κοτόπουλου, στο σώμα ευαίσθητων ζώων και σε μια καλλιέργεια κυττάρων όπως τα HeLa, McCoy, Hep-2. Η βέλτιστη θερμοκρασία καλλιέργειας είναι +35 C. Πριν από τη μόλυνση, οι κυτταροκαλλιέργειες ακτινοβολούνται ή υποβάλλονται σε επεξεργασία με κυκλοεξαμίδη, η οποία επιτρέπει στα χλαμύδια να απορροφούν πιο εύκολα το ATP. Το C. trachomatis, ο αιτιολογικός παράγοντας του αφροδίτικου λεμφοκοκκιώματος, χαρακτηρίζεται από υψηλότερη λοιμογόνο δύναμη και επομένως είναι ευκολότερο να καλλιεργηθεί σε όλα τα προτεινόμενα ζωντανά μοντέλα, χωρίς καν να απαιτείται προκαταρκτική προετοιμασία κυτταροκαλλιεργειών.
Ενζυμική δραστηριότητα.Τα χλαμύδια έχουν ένα μικρό σύνολο ενζύμων. Μπορούν να ζυμώσουν το πυροσταφυλικό οξύ, να συνθέσουν μερικά λιπίδια, κ.λπ. Αλλά τα χλαμύδια δεν είναι σε θέση να συνθέσουν ενώσεις υψηλής ενέργειας και εκτός των κυττάρων του ξενιστή οι μεταβολικές τους λειτουργίες μειώνονται στο ελάχιστο. Η παροχή μεταβολιτών στα χλαμύδια πραγματοποιείται κυρίως λόγω της ζωτικής δραστηριότητας των κυττάρων-ξενιστών. Επιπλέον, ορισμένοι μεταβολίτες (για παράδειγμα, η ισολευκίνη) μπορεί να είναι αναστολείς της ανάπτυξης των χλαμυδίων και, πιθανώς, να διασφαλίζουν την λανθάνουσα πορεία των χλαμυδίων.
Αντιγονική δομή.
Τα χλαμύδια έχουν τρεις τύπους αντιγόνων:
♦ Ειδικός για το γένος θερμοσταθερός λιποπολυσακχαρίτης (γλυκολιπίδιο), που βρίσκεται στο κυτταρικό τοίχωμα των χλαμυδίων. Ανιχνεύεται με χρήση RSC.
♦ ειδικό για το είδος αντιγόνο πρωτεϊνικής φύσης, που βρίσκεται πιο επιφανειακά - στην εξωτερική μεμβράνη. Εντοπίστηκε με χρήση RIF.
♦ ειδικό για παραλλαγή αντιγόνο πρωτεϊνικής φύσης.
Επιπλέον, το C. trachomatis και το C. psittaci έχουν τυποειδικά αντιγόνα, τα οποία είναι πιθανώς πεπτίδια μεμβράνης. Η ταξινόμηση των χλαμυδίων σε ορολογικές παραλλαγές, με βάση την αντιγονική τους δομή, παρουσιάζεται στον Πίνακα. 2
Παράγοντες παθογένειας.Οι πρωτεΐνες της εξωτερικής μεμβράνης των χλαμυδίων συνδέονται με τις συγκολλητικές τους ιδιότητες. Αυτές οι συγκολλητικές ουσίες βρίσκονται μόνο σε στοιχειώδη σώματα. Επιπλέον, τα χλαμύδια παράγουν ενδοτοξίνη (LPS). Ίσως μερικά από αυτά να εκκρίνουν μια εξωτοξίνη που έχει θανατηφόρο αποτέλεσμα: όταν χορηγείται ενδοφλεβίως προκαλεί το θάνατο ποντικών. Προφανώς, οι πρωτεΐνες της εξωτερικής μεμβράνης είναι ένας αντιφαγοκυτταρικός παράγοντας, αφού είναι σε θέση να καταστέλλουν τη σύντηξη του φαγοσώματος με το λυσόσωμα.
Επιπλέον, ορισμένα χλαμύδια έχουν τη λεγόμενη πρωτεΐνη θερμικού σοκ (HSP), η οποία μπορεί να προκαλέσει αυτοάνοσες αντιδράσεις.
Αντίσταση. Η αντοχή των χλαμυδίων σε διάφορους περιβαλλοντικούς παράγοντες είναι αρκετά υψηλή. Είναι ανθεκτικά σε χαμηλές θερμοκρασίες (δεν χάνουν τη δράση τους ακόμα και όταν είναι παγωμένα στους - 50... - 70 ° C), στεγνώνουν. Για παράδειγμα, ο αιτιολογικός παράγοντας της ψιττάκωσης μπορεί να παραμείνει στο εξωτερικό περιβάλλον (για παράδειγμα, στα απορρίμματα μιας φωλιάς πουλιών) έως και αρκετούς μήνες. Ωστόσο, όπως όλα τα βακτήρια που δεν σχηματίζουν σπόρια, τα χλαμύδια είναι αρκετά ευαίσθητα στη θερμότητα και αδρανοποιούνται γρήγορα από διάφορα απολυμαντικά.
Επιδημιολογία, παθογένεια, κλινική.Οι ασθένειες που προκαλούνται από τα χλαμύδια ονομάζονται χλαμύδια. Υπάρχουν ανθρωπονωτικά και ζωοανθρωπονωτικά χλαμύδια. Ασθένειες που προκαλούνται από ΜΕ.τραχωμάτηςΚαι ΜΕ.pneumoniae, – ανθρωπόπονες. Ορνίθωση, ο αιτιολογικός παράγοντας της οποίας είναι ΜΕ.psittaci, είναι μια ζωοανθρωπονωτική λοίμωξη. Η ψιττάκωση δεν μεταδίδεται από άτομο σε άτομο. S. resogit, S.abortus, ντο. felis και άλλοι τύποι χλαμυδίων επηρεάζουν μόνο τα ζώα.
Τα χλαμύδια είναι επιθηλιότροπα και επομένως μπορούν να μολύνουν το επιθήλιο διαφόρων οργάνων. Η μαζική αναπαραγωγή των χλαμυδίων στα επιθηλιακά κύτταρα οδηγεί στην καταστροφή της επιθηλιακής στιβάδας και στο σχηματισμό ελκών, τα οποία επουλώνονται με το σχηματισμό ουλών και συμφύσεων. Αλλαγές ουλής στον κερατοειδή με τράχωμα οδηγούν σε τύφλωση, φλεγμονή των πυελικών οργάνων με ουρογεννητικά χλαμύδια οδηγεί σε στειρότητα.
Μετά το θάνατο ενός μεγάλου αριθμού επιθηλιακών κυττάρων, το παθογόνο μπορεί να εισέλθει στο αίμα, στα παρεγχυματικά όργανα και να στερεωθεί στον λεμφικό ιστό. Αυτό είναι, ειδικότερα, χαρακτηριστικό της αφροδίσιας λεμφοκοκκιωμάτωσης και της ορνίθωσης. Επιπλέον, πολλοί τύποι χλαμυδίων είναι ικανοί για λανθάνουσα ύπαρξη ή επιμονή στον οργανισμό του ξενιστή, προκαλώντας ανοσολογικές και αλλεργικές αλλαγές στον οργανισμό, όπως στο σύνδρομο Reiter.
